Versatile high-fidelity DNA polymerase for any PCR application requiring precision
-
- High-fidelity amplification – >100x higher than Taq
- Superior performance with a variety of amplicons (between 30-79% GC content)
- Long-range and challenging PCR – up to 24 kb lambda DNA and 12 kb from gDNA
- Broad multiplexing capabilities
- Efficient dUTP incorporation – great for bisulfite sequencing workflows
- Inherently stable due to proprietary Stability TAG technology
- Glycerol-free version available upon request
Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase, 3′→5′ ekzonükleaz (proofreading) aktivitesine sahip modifiye edilmiş bir DNA polimerazdır. Tek molekül gerçek zamanlı (SMRT) dizileme yöntemiyle yapılan ölçümlerde, doğal Taq DNA polimeraza göre 100 katın üzerinde doğruluk (fidelity) göstermektedir.
Polimerazın kimyasal olarak modifiye edilmesi sayesinde Hot Start PCR özelliği kazanılmıştır. Bu özellik, özgüllüğü ve doğruluğu artırırken yanlış eşleşen primerlerden (mispriming) ve primer-dimerlerinden kaynaklanan istenmeyen uzamaları en aza indirir.
Yüksek doğruluk gerektiren DNA dizileme, klonlama, protein ekspresyonu ve benzeri uygulamalar için uygundur. Ayrıca artırılmış prosesivitesi sayesinde genomik DNA'dan 12 kb'ye, Lambda DNA'dan ise 24 kb'ye kadar uzun DNA parçalarının çoğaltılmasına olanak sağlar.
10× GC-rich Enhancer ile birlikte kullanıldığında, %30–79 GC içeriğine sahip zor şablonlarda güvenilir amplifikasyon gerçekleştirir. Üstün multipleks PCR performansı sayesinde çok sayıda farklı hedef bölgenin dengeli ve verimli şekilde çoğaltılmasını sağlar.
Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase, dUTP'leri etkin şekilde DNA'ya dahil edecek şekilde tasarlanmıştır. Bu nedenle aşağıdaki uygulamalar için idealdir:
- Bisülfit ile muamele edilmiş DNA'nın çoğaltılması (Bisulfite Sequencing)
- Hasarlı DNA örnekleri (ör. FFPE dokuları)
- dUTP ve UNG enzimi ile birlikte kullanılarak PCR carry-over kontaminasyonunun önlenmesi
Ayrıca hem enzim hem de kit, Solis BioDyne'ın patentli Stability TAG® polipeptit stabilizasyon teknolojisi sayesinde oda sıcaklığında 1 aya kadar stabil kalabilir. Bu özellik, soğuk zincire ihtiyaç duymadan çevre dostu taşımaya olanak sağlarken, PCR karışımlarının buz kullanılmadan oda sıcaklığında hazırlanmasını da mümkün kılar.
Uygulama Alanları
- Yüksek doğruluk gerektiren PCR uygulamaları
- Yeni nesil dizileme (NGS) kütüphane hazırlığı
- Klonlama
- Protein ekspresyonu
- Bölgeye özgü mutagenez (Site-Directed Mutagenesis)
- Uzun fragment PCR ve zorlu amplifikasyonlar (genomik DNA'da 12 kb'ye kadar)
- GC açısından zengin DNA şablonlarının amplifikasyonu
- Urasil içeren DNA veya dUTP kullanılan uygulamalar
- Bisülfit dizileme
- FFPE gibi hasarlı DNA örnekleri
- UNG ile carry-over kontaminasyonunun önlenmesi
- Yüksek multipleks PCR uygulamaları
- Liyofilizasyon (freeze-drying) uygulamaları için isteğe bağlı gliserolsüz versiyonu mevcuttur.
Teknik Özellikler
| Özellik |
Değer |
| Numune tipi |
DNA |
| Ürün formatı |
Reaktif kiti |
| Hot Start |
Var (Kimyasal aktivasyon, 12–15 dakika) |
| Doğruluk (Fidelity) |
Taq DNA Polimeraza göre >100 kat |
| Tespit yöntemi |
End-point analiz |
| PCR ürünü ucu |
Blunt-end |
| Maksimum amplikon boyutu |
12 kb (karmaşık örnekler / insan genomik DNA'sı), 24 kb (düşük kompleksiteli DNA, Lambda DNA) |
| Hedef sayısı |
1–18+ hedef (Multipleks PCR) |
Kit İçeriği
- Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase
- Konsantrasyon: 1 U/µl
- Enzim seyreltme tamponu içerisinde
- 5× HiFi Reaction Buffer
- 10 mM MgCl₂ içerir
- 1× çalışma konsantrasyonunda 2 mM MgCl₂ sağlar
- 10× GC-rich Enhancer
- GC açısından zengin veya amplifikasyonu zor DNA şablonlarının verimli çoğaltılmasını kolaylaştıran katkı reaktifi.